【好文共赏】不同采集方法对婴儿粪便肠道菌群鉴定的影响
Title: 《Collection of non-meconium stool on fecal occult blood cards is an effective method for fecal microbiota studies in infants》 Microbiome, 2017
研究目标:(1)粪便潜血检测卡能否替代常规采样方法?
(2)不同的采样装置、保存温度和保存时间对肠道菌群鉴定的影响
研究对象:8名儿童的粪便样本,采用不同采样装置重复采样,分别在不同温度保存不同时间后提取DNA。
采样装置: 粪便潜血检测卡(FOBT) vs Eppendorf管
保存温度:常温 vs 零下80度
保存时间:0-2天 vs 3-5天 vs 7天
核酸提取方法:手工法(Qiagen Qiamp DNA stool mini kit) vs 自动法(Qiagen,Valencia,CA)
取样情况详见下表
结果一:
不同的保存方法各指标间具有显著的差异(粪便潜血检测卡FOBT vs Eppendorf管)
结果二:
不同保存条件对肠道菌群的影响主要表现在特定菌属的丰度变化。
在婴儿胎粪和粪便中厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria)都占主要部分(86%~99%)。相比于保存于tb管中的样本,保存在检测卡中的粪便样本中厚壁菌门发生了显著的升高,而变形菌门发生了显著的降低。此外,在不同的保存容器中,嗜血杆菌属的丰度也有显著差别。
微微碎碎念:有些失望的结果。作为检测卡,FOBT体积小,易保存,取样量少,实在是很值得期待的临床应用取样容器。不过这结果说真的,也是意料之中了。再次证实了,保存时间、保存温度、保存装置都对微生态菌群结构具有影响! 研究过程中需小心,小心,再小心!